Etude de la localisation subcellulaire de la protéine 2A du virus de Theiler

Details

Supervisors

Michiels, Thomas

Faculty

Faculté de médecine et médecine dentaire

Degree label

Mémoire de master en sciences biomédicales

Abstract

Le virus de Theiler fait partie du genre des Cardinovirus appartenant à la famille des Picornaviridae. Les différentes souches du virus de Theiler sont classées en deux sous-groupes, les souches neurovirulentes et les souches persistantes, selon la pathologie qu’elles induisent. L’objet de ce mémoire était d’étudier la localisation subcellulaire de la protéine 2A codée par le virus de Theiler, dans l’espoir d’en tirer des informations sur la fonction de cette protéine. Pau de choses sont connues sur la protéine 2A. Elle est constituée de 133 acides aminés et participe au clivage co-traductionnel de la polyprotéine virale qui survient entre les protéines 2A/2B. Elle n’est pas indispensable pour la réplication du génome viral. Par immuno-fluorescence à l’aide d’un anticorps polyclonal dirigé contre la protéine 2A, nous avons montré que cette protéine peut être détectée dans le cytoplasme et le noyau des cellules infectées. De plus, la protéine 2A est détectée dans les nucléoles d’une proportion non négligeable de cellules. Cette localisation est confirmée par une co-localisation avec le protéine nucléolaire B23, observée en microscopie confocale. L’utilisation de virus mutants indique que la localisation nucléolaire de la protéine 2A ne dépend pas de la présence de la protéine L du virus, avec laquelle elle pourrait interagir. Une région de la protéine 2A, riche en acides aminés chargés positivement, semble être requise pour l’adressage nucléolaire de cette protéine. Cependant, des fusions eGFP-2A et 2A-eGFP exprimées à partir de vecteurs d’expression ne montrent pas de localisation nuléolaire. Enfin, nos données montrent que l’expression de la protéine 2A est toxique pour les cellules, bien que cette toxicité semble plus faible que celle de la protéine L. Les effets toxiques de ces deux protéines semblent s’additionner lorsque les deux protéines sont en présence