Etude de la région C-terminale du récepteur de l’IL-22 : Impact sur la signalisation de l’IL-22 dans le colon, le foie et le pancréas, ainsi que sur le trafic du récepteur à la membrane

Details

Supervisors

Dumoutier, Laure

Faculty

Faculté de pharmacie et des sciences biomédicales

Degree label

Master [120] en sciences biomédicales, à finalité approfondie

Abstract

L’interleukine-22 (IL-22) est une cytokine impliquée dans de nombreuses pathologies et dont les effets sont tantôt anti-inflammatoires, tantôt pro-inflammatoires. En plus d’induire la voie JAK-STAT en activant majoritairement STAT3, il a été démontré que l’IL-22 stimule aussi l’activation de STAT3 via un mécanisme alternatif, indépendant des tyrosines du récepteur mais dépendant de l’extrémité C-terminale (C-ter). Le premier objectif de ce mémoire est d’investiguer le rôle de cette voie alternative dans la réponse à l’IL-22 dans trois organes : le colon, le foie et le pancréas. Pour chacun de ces organes, nous avons réalisé des études in vitro, soit en modifiant génétiquement des cellules par CRISPRCas9 afin qu’elles expriment une forme tronquée de l’IL-22R, soit à l’aide de monobodies bloquant la voie alternative ; et in vivo, en utilisant des souris déficientes pour l’extrémité C-terminale de l’IL-22R. Les résultats que nous avons obtenus pour le colon ont permis de montrer que l’extrémité C-ter a peu d’impact sur la signalisation de l’IL-22R dans cet organe. Ces données sont en accord avec les observations faites précédemment au laboratoire sur un modèle murin de colite. Pour ce qui est du foie et du pancréas, nous avons mis en évidence le rôle de la région C-ter dans la phosphorylation de STAT3 et dans l’induction de certains gènes dont l’expression est stimulée par l’IL-22. L’étude du rôle de cette extrémité C-ter du récepteur en conditions pathologiques est actuellement en cours. Dans ce but, nous utilisons un modèle de pancréatite induite par la céruléine et deux modèles d’hépatites induites par l’injection de Concanavaline A ou de CCl4. Le deuxième objectif de ce mémoire est d’étudier le trafic intracellulaire emprunté par l’IL-22R dans le but de mieux comprendre le rôle de la partie C-ter dans celui-ci. Le défi majeur de ce projet est de parvenir à détecter le récepteur par microscopie optique. Nous avons donc mis au point un protocole d’immunofluorescence reposant sur l’utilisation d’anticorps polyclonaux maison combinés au Tyramide Superboost. En conclusion, mon projet nous permettra d’améliorer nos connaissances sur le rôle de la région C-terminale de l’IL-22R dans différents organes et dans le trafic du récepteur à la membrane.