Étude du rôle d’un variant dans le gène CD36 dans le développement d’une pathologie auto-inflammatoire

Details

Supervisors

Limaye, Nisha ; Tilman, Gaëlle

Faculty

Faculté de pharmacie et des sciences biomédicales

Degree label

Master [120] en sciences biomédicales, à finalité approfondie

Abstract

Le but de ce mémoire est d’étudier les conséquences fonctionnelles d’un variant (c.551A>T, p.Asp184Val) dans le gène CD36, identifié par Whole Exome Sequencing (WES), chez une patiente ayant un phénotype inflammatoire sévère. Les symptômes cliniques chez cette patiente incluent des épisodes de fièvre récurrents associés à des éruptions cutanées et des lésions osseuses diffuses. Son phénotype clinique est proche de celui observé chez des patients atteints de syndromes monogéniques auto-inflammatoires (MAIS), dans lesquels des mutations dans les gènes impliqués dans l’immunité innée déclenchent de nombreux symptômes inflammatoires. CD36 agit comme un récepteur de reconnaissance de motifs moléculaires (PRR, Pattern Recognition Receptor) dont l’activation induit la sécrétion de cytokines pro- inflammatoires via la formation de l’inflammasome, concordant ainsi avec les voies de signalisations impliquées dans les MAIS et, plus spécifiquement, les MAIS médiés par l’IL-1. La surexpression de la forme sauvage de CD36 (CD36WT) et variante (CD36D184V) dans des cellules HEK239T, n’exprimant pas CD36 de façon endogène, a permis d’observer une expression plus faible du variant CD36D184V par rapport à CD36WT par western blot et par cytométrie de flux. De plus, ce variant migre à un poids moléculaire moins élevé en comparaison à la forme sauvage. La plus faible expression de CD36D184V à la surface membranaire ainsi que sa migration différentielle pourraient indiquer que le variant de CD36 présente une maturation incomplète. Par la suite, nous voudrions, d’une part, analyser la localisation subcellulaire de la protéine variante par rapport à la forme sauvage et, d’autre part, analyser si une activation constitutive, une activation dépendante d’un ligand ou une réponse UPR (Unfolded Protein Response) due au mauvais transport de CD36D184V vers la membrane cellulaire, pourraient être à l’origine de l’activation de l’inflammasome.