Gilon, PatrickKelperi, LauraLauraKelperi2025-02-042025-02-042022https://dial-mem.test.bib.ucl.ac.be/handle/123456789/29356Les îlots de Langerhans jouent un rôle primordial dans la régulation de la glycémie. Le glucagon sécrété par les cellules α pancréatiques est l’hormone hyperglycémiante la plus importante. Le dysfonctionnement de la sécrétion du glucagon contribue à l’étiologie du diabète; deux altérations de cette sécrétion ont été mises en évidence: une hyperglucagonémie chronique qui aggrave l’hyperglycémie ainsi qu’un défaut de sécrétion de glucagon en réponse à l’hypoglycémie. Les mécanismes par lesquels le glucose contrôle la sécrétion de glucagon demeurent controversés. Il est bien établi que l’influx de Ca2+ dans la cellule α est l’évènement déclencheur de l’exocytose des granules de glucagon. Cependant, il a également été suggéré que la sécrétion du glucagon est contrôlée par des modulations d’AMPc. De plus, on ne sait pas si l’effet du glucose est médié par une action directe sur les cellules α ou par une action paracrine indirecte impliquant les cellules β ou δ. Le présent mémoire a pour objet d’étudier le rôle de l’AMPc dans le contrôle de la sécrétion du glucagon par le glucose. Pour ce faire, nous avons utilisé le modèle de souris iGCG-Cre CAMPER, permettant d’effectuer des mesures de la concentration d’AMPc cytosolique ([AMPc]c) spécifiquement dans la cellule α, et nous avons également réalisé des périfusions aux mêmes conditions que pour les mesures de la [AMPc]c afin de corréler ces mesures à la sécrétion de glucagon. Nos expériences suggèrent que le glucose exerce un effet direct sur la cellule α. En effet, nous avons testé l’effet d’une baisse de la concentration de glucose de G7 (7mM) à G1 (1mM) sur la la [AMPc]c dans la cellule α étant donné que celle-ci augmente la sécrétion de glucagon. Nous observons une augmentation de la [AMPc]c et cet effet persiste en présence d’antagonistes des récepteurs de la somatostatine. En outre, le G1 augmente également la [AMPc]c en présence de diazoxide, un agent permettant d’hyperpolariser les cellules de l’îlot, diminuant ainsi la [Ca2+]c et inhibant donc les sécrétions des cellules α, β et δ. Enfin, l’utilisation de cellules dispersées, permettant de s’affranchir des interactions paracrines, confirme que le G1 augmente la [AMPc]c par un effet direct sur la cellule α. Nos résultats suggèrent également que l’effet du glucose est médié par les phosphodiestérases, car les effets du glucose sur la [AMPc]c sont abolis en présence d’IBMX (un inhibiteur des phosphodiestérases), mais pas en présence de forskoline (un activateur des adénylates cyclases). Finalement, nos expériences en présence de diazoxide suggèrent que la [Ca2+]c est nécessaire à la sécrétion de glucagon et que l’AMPc jouerait un effet amplificateur sur celle-ci.cellule α pancréatiqueAMPcglucagontext::thesis::master thesisthesis:38340