Lorent, Joseph H.Bouggar, SelmaSelmaBouggar2025La résistance aux antibiotiques, favorisée par leur usage excessif et inapproprié, constitue un enjeu majeur de santé publique. Staphylococcus aureus résistant à la méticilline (MRSA) est une menace importante, notamment en milieu hospitalier. En 2019, S. aureus était la deuxième cause de décès liés à la résistance aux antibiotiques, avec 121 000 morts attribuées au MRSA. Staphylococcus aureus résiste aux β-lactames grâce à la production de β-lactamases et à l’expression de la protéine PBP2a, issue du gène mecA. La structure de PBP2a limite l’action des antibiotiques en empêchant leur accès au site actif, permettant ainsi la poursuite de la synthèse du peptidoglycane. Des études récentes suggèrent que la PBP2a se localise dans des microdomaines membranaires fonctionnels (FMM), formés par l’interaction de lipides, les staphyloxanthines (STX) et de protéines d’échafaudage, les flottilines permettant le recrutement et l’oligomérisation des PBP2a. Ce mémoire explore l’effet de la simvastatine et de la naftifine, inhibiteurs de la biosynthèse des STX, sur diverses propriétés membranaires des MRSA. La perméabilité membranaire a été évaluée par spectrophotométrie après marquage à l’iodure de propidium, un agent fluorescent pénétrant uniquement les cellules perméabilisées; le packing membranaire global et celui de la monocouche externe ont été analysés respectivement par spectrophotométrie de fluorescence utilisant les sondes C-Laurdan et Di4, permettant de caractériser l’organisation des lipides membranaires ; le profil lipidique membranaire a été étudié par chromatographie sur couche mince (CCM) après extraction des lipides ; et enfin, la synthèse de la paroi a été explorée par suivi temporel de l’incorporation du HADA, un acide aminé D-Alanine fluorescent, au peptidoglycane, afin d’évaluer d’éventuelles différences entre les souches USA300 (MRSA) et 8325-4 (MSSA). Les résultats démontrent que la simvastatine et la naftifine inhibent la synthèse des STX, entraînant une éventuelle diminution de la CMI de l’oxacilline sous 4 µg/mL. La simvastatine, n’a pas induit de changement significatif de perméabilité membranaire des MRSA. Les deux inhibiteurs de STX semblent augmenter le packing membranaire global, tandis qu’une diminution est suggérée au niveau de la monocouche externe. L’analyse lipidique indique une possible modulation de l’expression du Lysyl-PG, nécessitant des investigations supplémentaires. Ces travaux ouvrent des perspectives quant au rôle des inhibiteurs de STX dans la modulation de la résistance des MRSA aux β-lactames.MRSAstaphyloxanthinessimvastatinenaftifinetext::thesis::master thesisthesis:49959