Métabolisme de la 2-chlorodésoxyadénosine dans les lymphocytes de patients atteints de leucémie lymphoïde chronique : essai de prédiction de la réponse thérapeutique

Details

Supervisors

Van den Berghe, Georges ; Gala, Jean-Luc

Faculty

Faculté de médecine et médecine dentaire

Degree label

Mémoire de licence en technologie biomédicale

Abstract

La 2-chloro-2’-désoxyadénosine (CdA) est un nucléoside de synthèse, analogue de la 2’-désoxyadénosine. Elle est utilisée actuellement pour le traitement de plusieurs types de pathologies, en particulier la leucémie à tricholeucocytes, pour laquelle elle est le traitement de choix, et la leucémie lymphoïde chronique (LLC). Dans ce dernier cas, une résistance au traitement se manifeste d’emblée chez un pourcentage assez élevé de patients. Le CdATP étant considéré comme le métabolite cytotoxique de la CdA, il a été proposé pour expliquer la résistance de certains patients à la CdA, que les lymphocytes de ces derniers accumulaient moins de CdATP que les lymphocytes de patients sensibles à la CdA. Cette moindre accumulation de CdATP pourrait être due à une moindre activité de la deoxycytidine kinase (dCK), l’enzyme qui phosphoryle la CdA en CdAMP, et/ou à une activité plus élevée de 5’-nucléotidase (5’-NT), l’enzyme qui déphosphoryle, quoique non absoule, a pu être établie entre la réponse au traitement à la CdA et le rapport des activités dCK/5’-NT dans leurs lymphocytes. Dans ces travaux cependant, l’activité dCK avait été déterminée à des concentrations non thérapeutiques de CdA et celle de la 5’-nucléotidase avec un autre substrat que le CdAMP, ce qui pourrait éventuellement mener à des interprétations incorrectes. Nous avons dès lors décidé, et c’est l »objet de notre travail, d’étudier le rapport des activités dCK/5’-Nt non pas dans des extraits de lymphocytes mais dans des lymphocytes intacts, incubés en présence de doses thérapeutiques de CdA, dans le but d’avoir un test qui permettrait de prédire la sensibilité du patient atteint de LLC à la CdA. La première partie de notre travail a consisté à mettre au point la mesure de la phosphorylation de la CdA et de la déphosphorylation de ses nucléotides dans les lymphocytes isolés du sang périphérique de patients atteints de LLC, puis de comparer la vitesse de ces 2 processus chez différents patients. La méthode est maintenant au point mais le nombre de patients que nous avons pu analyser n’est pas suffisant pour qu’on puisse en tirer des conclusions d’un point de vue prédictif. Comme la récolte de prélèvements sanguins n’a pas toujours été facile, nous avons testé dans un second volet de notre travail l’effet de la cryopréservation sur la phosphorylation de la CdA et la déphosphorylation de ses nucléotides. Nous avons pu montrer que les lymphocytes cryopréservés puis décongelés se comportaient comme des lymphocytes frais, ) condition qu’ils aient été prélevés et isolés comme ces derniers. Ces informations permettront de faciliter la suite de cette étude et un changement dans la façon de conserver les lymphocytes à L’ESP