Rôle des lymphocytes B du rat dans la production d'anticoprs thymo-indépendants

Details

Supervisors

Bazin, Hervé ; Latinne, Dominique

Faculty

Faculté de médecine et médecine dentaire

Degree label

Mémoire de licence en technologie biomédicale

Abstract

Chez le rat, la rate est composée de pulpe rouge renfermant essentiellement des globules rouges et de pulpe blanche composée d’une zone marginale et d’une zone folliculaire. Ces deux zones renferment des lymphocytes B caractérisés par des marqueurs membranaires spécifiques. On retrouve au niveau de la zone folliculaire des lymphocytes IgMfaible IgMdfort tandis qu’au niveau de la zone marginale on retrouve des lymphocytes IgMfort IgMdfaible. Ces lymphocytes de la zone marginale pourraient intervenir dans la production d’anticorps thymo-indépendants, principalement d’isotype IgM et IgG2c. dans la pulpe blanche, il existe aussi une zone peuplée de lymphocytes T, autour de l’artériole centrale. Le but de ce mémoire est de démontrer que la zone marginale de la rate intervient bien dans les réponses immunes aux antigènes thymo-indépendants chez le rat. Nous avons d’abord étudié la prédominance de certains isotypes d’immunoglobulines par organe lymphoïde en quantifiant le nombre de plasmocytes sécréteurs de différents isotypes au niveau de ces organes. Nous avons alors mis au point un protocole de transfert de lymphocytes de rate ou de ganglions lymphatiques entre animaux d’allotypes différents pour étudier la réponse de ces animaux vis-à-vis d’un antigène thymo-dépendant ou d’un antigène thymo-indépendant. Enfin, nous avons mis au point, à l’aide du MACS, une technique de purification de lymphocytes B de la zone marginale, se basant sur les caractéristiques des immunoglobulines de membrane de ces lymphocytes, afin de prouver leur rôle dans la production d’anticorps thymo-indépendants. On constate que c’est dans la rate d’un rat normal que l’on retrouve le plus grand nombre de plasmocytes sécréteurs d’IgM alors que, chez un rat immunisé avec un antigène thymo-indépendant, on retrouve des plasmocytes sécréteurs d’anticorps spécifiques d’isotype IgG2c et IgM. Nous avons observé, qu’après un transfert de lymphocytes provenant d’une rate totale, la zone folliculaire était repeuplée par des lymphocytes IgMfaible IgMdfort et la zone marginale par des lymphocytes IgMfort IgMdfaible. Provenant du donneur. Après transfert de lymphocytes provenant de ganglions lymphatiques, seule la zone folliculaire de la rate était repeuplée par des lymphocytes IgMfaible IgMdfort. Lors du transfert de lymphocytes de rate, on obtient une réponse aux antigènes thymo-indépendants tandis qu’après transfert de cellules de ganglions mésentériques on n’obtient pas cette réponse ce qui suggère que la zone intervient bien dans la production d’anticorps thymo-indépendants. nous n’avons malheureusement pas pu étudier la réponse des cellules de la zone marginale vis-à-vis d’un antigène thymo-indépendant car la quantité de lymphocytes récoltée au cours de la purification était trop faible pour obtenir un repeuplement suffisant de la rate. Afin de confirmer que les lymphocytes B de la zone marginale interviennent dans la production d’anticorps thymo-indépendants, il faudrait pouvoir purifier plus de lymphocytes B de la zone marginale. Un moyen d’y arriver serait toujours d’utiliser la technique du MACS mais avec une colonne de plus gros calibre (SUPER MACS). Une autre possibilité serait d’utiliser la colonne du MACS décrite dans ce mémoire, pour récolter une petite quantité de lymphocytes de la zone marginale que l’on mettrait ensuite en culture afin de les faire proliférer et ensuite d’étudier leur réponse, in vitro, vis-à-vis d’antigènes thymo-dépendants ou thymo-indépendants.