Rôle d’eIF2α dans la régulation de la synthèse des protéines dans les cellules myogéniques C2C12

Details

Supervisors

Deldicque, Louise

Faculty

Faculté des sciences de la motricité

Degree label

Master [120] en sciences de la motricité, orientation éducation physique, à finalité approfondie

Abstract

L'objectif de cette recherche est d'étudier la réponse au niveau de la synthèse des protéines des cellules C2C12 pour différents mutants de la sous-unité α du facteur eucaryotique d'initiation 2 alpha (eIF2α). Ce travail vise à explorer de quelle manière la phosphorylation d’eIF2α, la sous-unité α du facteur d'initiation 2 des eucaryotes (peIF2α) peut affecter la traduction. D’un quasi-consensus, la phosphorylation d’eIF2α réduit la traduction, ce qui entraîne une diminution du signal lumineux émis par les protéines ayant migré sur un gel SDS-PAGE avec l’anticorps anti-puromycine testé. Concrètement, la mutation S51D imite la phosphorylation d'eIF2α au niveau de la serine (ser) 51 et entraine des niveaux plus élevés de peIF2α (ser) 51 par rapport au Wild Type (WT). Cette mutation entraine normalement une diminution de la traduction. En revanche, la mutation S51A empêche la phosphorylation d'eIF2α (ser) 51 et entraine normalement une augmentation de la traduction. Dans le cadre d'une seconde expérience, des cellules C2C12 ont été exposées pendant 3h au sérum de veau fœtal (FBS) pour induire un changement aigu de l’état de phosphorylation d'eIF2α (ser) 51. Le test statistique de comparaison multiple de cette deuxième expérience indique une différence d’état de phosphorylation d’eIF2α ser (51) significative (p=0.0094) entre le groupe traité avec une concentration de 0% de FBS et celui avec 20% de FBS. Le coefficient de détermination R² du test de corrélation de Pearson entre le rapport peIF2α/eIF2α total et la variation du taux de synthèse protéique globale était de 0,9427, ce qui indique que 94,27 % de la variation du taux de synthèse protéique globale peut être expliquée par le rapport peIF2α/eIF2α total. Le test de significativité de la corrélation (test unilatéral) a donné une valeur de p de 0,0145. De manière surprenante, contrairement à l'état de phosphorylation aigu d'eIF2α (ser) 51 induit par un traitement avec du FBS pendant 3h, les résultats ne permettent pas de suggérer une relation entre le rapport peIF2α/eIF2α total et la variation du taux de synthèse protéique globale. Il est possible que, lorsqu’un état de phosphorylation d'eIF2α ser (51) est induit de manière constitutive par des plasmides, d'autres mécanismes de régulation de la traduction soient impliqués.