Impact d’une surexpression de peroxyrédoxine 3 et sulfirédoxine sur les concentrations cytosolique et mitochondriale en H2O2 dans les cellules β pancréatiques de rat et la sécrétion d’insuline en réponse au glucose

Details

Supervisors

Jonas, Jean-Christophe

Faculty

Faculté de médecine et médecine dentaire

Degree label

Master [180] en médecine, à finalité spécialisée

Abstract

Introduction : Le diabète de type 2 se caractérise par une insulinorésistance et une hyperglycémie chronique dans un contexte d’inflammation métabolique de faible intensité. Ceci favorise la formation de composés toxiques, tel le peroxyde d’hydrogène (H2O2), qui contribuent à la dysfonction, la mort des cellules β pancréatiques et à l’aggravation progressive de la maladie. Objectifs : L’objectif de mon projet était d’étudier l’effet de la surexpression de deux protéines antioxydantes, la sulfirédoxine (SRXN1) et la peroxyrédoxine 3 (PRDX3), seules ou en combinaison, sur la capacité des cellules β à dégrader l’H2O2 mitochondrial et cytosolique et sur la sécrétion d’insuline en réponse au glucose. Méthodes : Nous avons utilisé deux modèles de cellules β : les îlots de rat Wistar et la lignée de cellules INS-1 832/13. Après surexpression de SRXN1 et PRDX3 par infection adénovirale, nous avons mesuré les changements de concentration en H2O2 cytosolique ou mitochondrial lors de l’application de concentrations croissantes d’H2O2 exogène et en présence de différentes concentrations de glucose. Ces mesures ont été réalisées avec la sonde fluorescente ratiométrique roGFP2-ORP1 qui présente une grande sensibilité et spécificité pour le suivi de l’H2O2 dans le compartiment subcellulaire où elle est exprimée (cytosol ou matrice mitochondriale). Quant à la sécrétion d’insuline en réponse au glucose, elle a été mesurée par dosage radioimmunologique (RIA) après incubation de cellules INS-1 832/13 en présence de concentrations croissantes de glucose 48h après infection adénovirale. Résultats : Concernant les mesures de l’H2O2, les résultats confirment l’augmentation statistiquement significative de l’oxydation des sondes roGFP2-ORP1 par l’H2O2 exogène qui était d’autant plus importante que la concentration de glucose était faible. Il n’y avait cependant aucune différence statistiquement significative entre les groupes qui surexprimaient SRXN1, PRDX3, PRDX3+SRXN1 et le groupe contrôle (infecté avec un virus vide Adnull ou un virus codant mCherry, ou seulement infecté pour expression de la sonde). Ces observations valent pour les deux modèles utilisés. D’autre part, la sécrétion d’insuline était significativement stimulée par le glucose (de 2 à 15 mM) dans chacun des 5 groupes (contrôle, Adnull, PRDX3, SRXN1, PRDX3-SRXN1), mais il n’y avait aucune différence statistiquement significative entre ces groupes. Conclusion : La surexpression de PRDX3 et SRXN1, seules ou en combinaison, dans les modèles d’ilots de rat et d’INS-1 832/13, n’affecte pas la capacité des cellules β à détoxifier l’H2O2 lors d’un stress aigu et n’améliore pas significativement leur capacité à sécréter l’insuline en réponse au glucose.

Citations

• APA

Ladrière, K. (2024). Impact d’une surexpression de peroxyrédoxine 3 et sulfirédoxine sur les concentrations cytosolique et mitochondriale en H2O2 dans les cellules β pancréatiques de rat et la sécrétion d’insuline en réponse au glucose. https://dial-mem.test.bib.ucl.ac.be/handle/2078.2/37451