Étude de la stabilité thermique de pXO16 et de son spectre d’hôte hors du groupe B. cereus s.l.

Details

Supervisors

Mahillon, Jacques

Faculty

Faculté des bioingénieurs

Degree label

Master [120] : bioingénieur en chimie et bioindustries

Abstract

Les plasmides sont des éléments génétiques qui apportent des gènes accessoires à la bactérie hôte et lui permettent une adaptation à de nouvelles niches environnementales. Les plasmides peuvent aussi être des vecteurs de facteurs de virulence ou de gènes de résistances à des toxines ou à des antibiotiques. Certains plasmides ont en outre la capacité de se transmettre d’une cellule à l’autre grâce au phénomène de conjugaison. Ce mécanisme de transfert horizontal de gènes chez les bactéries nécessite un contact entre les cellules donneuses et receveuses. Les gènes mpf (mating pair formation) sont impliqués dans la formation de la "paire de conjugaison" alors que les gènes de mobilisation sont impliqués dans le traitement et le transfert de l’ADN d’une cellule à l’autre grâce à un système de sécrétion de type IV (T4SS) présent chez les bactéries Gram-négatives et Gram-positives. Bacillus thuringiensis sv. israelensis est une bactérie Gram-positive du groupe B. cereus, dont le caractère entomopathogène lui confère des propriétés biopesticides utilisées en agriculture et dans la lutte contre les moustiques vecteurs de maladies (malaria, la dengue ou encore la fièvre jaune). Les δ-endotoxines, à l’origine du caractère entomopathogène, sont codées par des gènes cry portés par des plasmides, souvent conjugatifs. Le plasmide conjugatif pXO16, de B. thuringiensis sv. israelensis, se distingue par la formation d’agrégats de cellules visible à l’échelle macroscopique durant la conjugaison. Jusqu’à ce jour, le spectre d’hôte connu de pXO16 se limitait au groupe B. cereus. La première partie de ce mémoire portait sur l’exploration d'un spectre d’hôte potentiel de pXO16 en dehors du groupe B. cereus. Des tests de conjugaison ont été réalisés avec des bactéries appartenant aux groupes Listeria et Staphylococcus. Les résultats obtenus durant ce mémoire n'ont pas mis en évidence de transfert de pXO16 vers des souches de Listeria ou de Staphylococcus, suggérant un potentiel de transfert horizontal de ce plasmide limité aux membres du groupe B. cereus. Des indices concernant l’instabilité de pXO16 à des températures supérieures à 37°C avaient été récemment observés. Durant ce mémoire, la stabilité de pXO16 à différentes températures a été investiguée. Le plasmide est maintenu chez différentes bactéries du groupe B. cereus à des températures allant de 8°C à 42°C. Les prétests de stabilité 43°C ont montré que pXO16 est instable dans une souche de B. thuringiensis sv. israelensis, mais stable dans une souche de B. thuringiensis sv. kurstaki.