Identification du rôle du domaine intracellulaire de GARP dans l’activation du TGF-β1 latent

Details

Supervisors

Lucas, Sophie

Faculty

Faculté de pharmacie et des sciences biomédicales

Degree label

Master [120] en sciences biomédicales, à finalité approfondie

Abstract

Les lymphocytes T régulateurs, ou Tregs, sont des cellules essentielles au maintien de la tolérance immunitaire. Les Tregs exercent cette fonction via plusieurs mécanismes, incluant la production d’une cytokine immunosuppressive connue sous le nom de TGF-β1 (Transforming Growth Factor β1). Cette dernière est produite sous une forme latente (inactive) par la plupart des types cellulaires et n’est activée que par un nombre restreint de cellules, en réponse à des stimuli spécifiques. Les Tregs activent le TGF-β1 latent lorsqu’ils sont stimulés par un antigène. Le groupe du Professeur Sophie Lucas a identifié deux protéines impliquées dans l’activation du TGF-β1 par les Tregs : GARP, une protéine transmembranaire qui présente le TGF-β1 latent à la surface cellulaire, et l’intégrine αVβ8. Néanmoins, ces deux protéines ne semblent pas être suffisantes pour activer la cytokine. Grâce aux criblages d’une bibliothèque d’ADN complémentaires de Tregs stimulés, les travaux récents du laboratoire ont identifié des potentiels candidats qui pourraient contribuer à l’activation du TGF-β1 latent par les Tregs en présence de l’intégrine αVβ8 et de GARP. La manière dont ces candidats, qui sont tous des protéines intracellulaires, interviennent dans l’activation reste encore inconnue. Une hypothèse est que ces candidats interagiraient avec l’extrémité C-terminale intracellulaire de GARP. Ce domaine est néanmoins peu décrit dans la littérature. Le but de ce projet était d’identifier le potentiel rôle du domaine intracellulaire de GARP dans l’activation du TGF-β1 latent. Nous avons construit un plasmide codant une forme de GARP dépourvue de son domaine intracellulaire (GARP∆IC). Nous avons transfecté des cellules HEK 293T avec ce plasmide et les avons testées dans un système rapporteur en présence de TGF-β1 et d’intégrine αVβ8, afin de mesurer la production de TGF-β1 actif. Nous avons observé que le TGF-β1 latent peut être activé lorsqu’il est présenté à l’intégrine αVβ8 par GARP∆IC et que cette activation est inhibée par un anticorps dirigé contre les complexes GARP:TGF-β1 latent. Nos résultats suggèrent donc que le domaine intracellulaire de GARP n’est pas requis pour l’activation du TGF-β1 latent. L’ancrage de cette protéine à la membrane semble suffisant pour activer la cytokine.