Effet du lactate sur l'AMPc dans des myotubes C2C12

Details

Supervisors

Francaux Marc

Faculty

Faculté de médecine et médecine dentaire

Degree label

Master [180] en médecine

Abstract

Il est de plus en plus reconnu que le lactate n’est plus seulement un simple produit final de la glycolyse anaérobie, mais est également un signal clé dans la régulation métabolique. Le muscle squelettique à l’exercice est considéré comme le principal site de production et de libération de lactate. Des études récentes ont permis la mise en évidence d’un récepteur GRP81 sur lequel le lactate exerce une action agoniste. Ce récepteur est principalement exprimé dans le tissu adipeux et peut être activé par le lactate produit à ce niveau, entrainant une inhibition de la lipolyse. Dans ce travail, nous souhaitons tester l’hypothèse que dans le muscle squelettique, le lactate produit lors d’un exercice physique intense, pourrait réguler négativement l'utilisation des substrats comme le glycogène et le triglycérides intramyocytaires par l’intermédiaire du récepteur GPR81 et l’inhibition consécutive de l’adénylate cyclase. Pour amener des premiers éléments objectifs qui pourraient supporter cette hypothèse, nous avons travaillé sur des cellules myogéniques C212. Le dosage de l’AMPc a été réalisé par un spectrophotomètre à balayage manuel en utilisant le mode absorbance et un kit AMPc commercial (Cyclic AMP XP® Assay Kit). Des dosages protéiques des échantillons ont été réalisés pour obtenir un rapport [AMPc]/[protéines]. Nous avons incubé les myotubes avec différentes concentrations d’adrénaline et de lactate pour rechercher leurs effets sur les rapports [AMPc]/[protéines]. Enfin, des expériences avec incubation de l’agoniste du GPR81, l’acide 2,3 — dihydroxybenzoïque (DHBA) et de l’antagoniste, le 3-hydroxybutyrate (3HB) avec dosage de rapports [AMPc]/[protéines] ont aussi été réalisées pour mettre en évidence cette voie de signalisation (adrénaline/AMPc/lactate/récepteur GPR81). Les résultats obtenus ne nous permettent pas de tirer de conclusion. Réitérer ces expériences dans le futur pour avoir plus de données permettrait d’analyser des tendances significatives. Ce travail nous a permis la réalisation de mises au point et pourrait servir de projet pilote. D’autres études pourraient, sur ces données originales, vérifier l’existence in vivo de cette boucle de rétroaction pour comprendre la cinétique du lactate et les voies de signalisation dont il est un intermédiaire.