Recherche de modulateurs de l’activité du protéasome

Details

Supervisors

Vigneron Nathalie

Faculty

Faculté de pharmacie et des sciences biomédicales

Degree label

Master [120] en sciences biomédicales, à finalité approfondie

Abstract

Le protéasome est un complexe enzymatique multiprotéique qui permet la dégradation des protéines. La chambre catalytique du protéasome est constituée de quatre anneaux, contenant chacun 7 sous-unités α ou 7 sous-unités β, parmi lesquelles trois sont des sous- unités catalytiques (β1, β2 et β5). Si le protéasome est crucial pour maintenir l’homéostasie cellulaire en dégradant les protéines endommagées et non fonctionnelles, il intervient également dans la régulation de divers processus, dont l’apoptose ou le déroulement du cycle cellulaire. Il constitue donc une cible thérapeutique dans le traitement des cancers et les maladies neurodégénératives. Par le passé, diverses études ont montré que de nombreux métabolites naturels présentaient des activités anti-inflammatoires, antibiotiques ou pro-apoptotiques. Toutes ces activités pourraient être liées à une modulation de l’activité du protéasome. Notre projet de recherche vise à identifier des composés capables de moduler l’activité du protéasome et d’étudier comment les composés identifiés agissent sur l’activité du protéasome. Afin d’étudier l’activité du protéasome, notre laboratoire a mis au point un test basé sur la capture sur plaque des protéasomes contenus dans un lysat cellulaire. La mesure de leur activité est alors réalisée à l’aide de petits peptides fluorogéniques. En utilisant ce test d’activité, nous avons montré qu’un composé naturel, activait fortement le protéasome. La séparation de l’extrait par HPLC nous a permis d’identifier une molécule ayant un potentiel activateur sur le protéasome. Nous avons confirmé son pouvoir activateur sur le protéasome en utilisant la sonde me4BodipyFL- Ahx3Leu3VS, qui évalue l’activité du protéasome au sein même des cellules. Par ailleurs, l’effet de ce composé sur la dégradation des protéines ubiquitinées et de la protéine proto- oncogène déstructurée c-Fos, a été étudié par western blot. Ces expériences nous ont permis d’émettre l’hypothèse selon laquelle le composé pourrait entraîner la dislocation du régulateur 19S de la chambre catalytique 20S, favorisant ainsi la dégradation des protéines déstructurées de manière ubiquitine-indépendante.