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- Les espèces Lactococcus lactis et Lactococcus cremoris sont utilisées comme culture de démarrage dans le cadre de la fermentation des produits laitiers. Elles suscitent aussi un grand intérêt pour des applications biotechnologiques. Au vu de leurs nombreux usages, une méthode d’édition génomique efficace et précise telle que la transformation naturelle serait un atout de taille. Celle-ci peut être définie comme étant un mécanisme d’assimilation et de recombinaison dans le génome d’ADN exogène présent dans l’environnement cellulaire. Elle est scindée en deux phases : la phase précoce caractérisée par l’expression du régulateur central de la compétence ComX et la phase tardive comprenant l’activation des gènes tardifs permettant la capture, l’internalisation et l’intégration de l’ADN. Cependant, l’analyse des génomes des lactocoques révèle que la majorité des souches séquencées contiennent une ou plusieurs mutation(s) dans le régulon com tardif, suggérant une perte de fonctionnalité. L’objectif principal de ce travail est de restaurer la compétence dans cinq souches ayant un intérêt industriel ou scientifique. Pour ce faire, deux stratégies ont été mises en œuvre. La première fait intervenir des plasmides recombinants présentant une version réparée des gènes altérés. La seconde ambitionne de réparer les gènes au niveau du chromosome.